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氣相色譜(gaschromatography簡稱GC)是分離和鑒定低分子量氣體或揮發(fā)性液體的理想技術(shù),它在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國防、建設、科學研究中都得到了廣泛應用。氣相色譜可分為氣固色譜和氣液色譜。高效液相色譜法的原理與氣相色譜法的原理相同。但是氣相色譜不適用于不揮發(fā)物質(zhì)和對熱不穩(wěn)定物質(zhì),而液相色譜卻不受樣品的揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,有些樣品因為難以汽化而不能通過柱子,熱不穩(wěn)定的物質(zhì)受熱會發(fā)生分解,也不適用于氣相色譜法。這使氣相色譜法的使用范圍受到了限制。清楚了解這兩種分離技術(shù)之間...
恒譜生建議各位色譜操作者在進行液相色譜分析前,關注樣品過濾的重要性,這是為什么呢?主要是為防止蛋白質(zhì)等雜質(zhì)沉積在色譜柱上,上柱前需對生物樣品進行去蛋白的預處理。這樣可以延長色譜柱壽命并減少維護成本,從而有助于提高實驗室通量。脫蛋白對于分析生物液體(例如血漿,血清,尿液和腦脊髓液)中的抗生素,殘留農(nóng)藥含量等也起著非常重要的影響。并且如果不將沉淀的蛋白質(zhì)從樣品中去除,會導致色譜柱性能下降,最終影響色譜分析結(jié)果的準確性。生物樣品中去除蛋白質(zhì)的處理方法有3種:利用蛋白質(zhì)脫水沉淀。采用...
色譜柱填料技術(shù)呈現(xiàn)二大趨勢。一個趨勢是快速液相,利用亞2?m小粒徑硅膠、核殼型硅膠;第二大趨勢是越來越豐富的選擇性。填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù),即柱效和背壓。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3μm的填料應用,在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是位一的因素。如果固定相選擇是真確,但是分離度不夠,那么選擇更小粒度的填料是很用有的,3μm填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而,3μm的色相譜的背壓卻是5μm的2倍。與此同時,柱效提高意味...
色譜工作者都知道,在液相色譜儀或者高效液相色譜儀工作時,不能有氣泡進入系統(tǒng),否則會出現(xiàn)諸如雜峰、壓力波動不穩(wěn)定和基線噪音等問題。通常對氣泡這種問題,要預先進行處理,如果等到氣泡進入系統(tǒng)想要處理,可就不那么容易了。對流動相進行提前過濾和脫氣處理,這是一個比較好的解決辦法。大家可能會想,我選擇實驗分析的HPLC級溶劑還要過濾嘛?答案是:還是要過濾的!流動相過濾可以選擇溶劑過濾器,過濾掉里面的雜質(zhì)和避免空氣進入系統(tǒng)里。恒譜生溶劑過濾頭可有效濾除流動相中的固體顆粒雜質(zhì),不會產(chǎn)生氣泡,...
無論氣相色譜還是液相色譜,我們最終用來分析實驗結(jié)果的都是色譜峰。zui理想的色譜峰長什么樣呢?它長得如下圖所示,符合高斯分布的兩邊對稱的色譜峰是理想的峰形。而做色譜分析實驗就好像買彩piao,不是每次都有理想的實驗結(jié)果出現(xiàn)的。更多時候,總是會出現(xiàn)一些“奇奇怪怪”的峰型,比如峰拖尾、峰前延、倒峰、寬峰等。為什么會出現(xiàn)這樣的情況呢?要針對不同的峰型來具體分析。比如峰拖尾,這是比較常見的峰型,可能有以下幾種原因:色譜柱如果受到污染,會導致柱效下降,影響分析效果。如果等到發(fā)現(xiàn)柱頭污染...
如果說色譜柱在液相色譜分析中的作用好比人的“大腦”,那么色譜填料就好比我們?nèi)说摹靶呐K”。液相分析結(jié)果好壞和準確性,與填料有著非常重要的聯(lián)系。液相色譜填料的種類有很多,主要分為聚合物填料、硅膠基質(zhì)填料和其它無機填料。其中,硅膠基質(zhì)的填料被廣泛應用于各種液相色譜分析中。硅膠填料有什么好處呢?硅膠基質(zhì)純度高,pH值通常在2-8之間,有些特殊的硅膠鍵合相的ph值可以穩(wěn)定在pH1.5-10。同時還具有比較高的比表面積,高比表面積具有較強的保留能力、柱容量和分離度;機械強度大,可以保證在...