如果固定相選擇是真確，但是分離度不夠，那么選擇更小粒度的填料是很用有的，3μm填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而，3μm的色相譜的背壓卻是5μm的2倍。與此同時(shí)，柱效提高意味著在相同條件下可以選擇更短的色譜柱，以縮短分析時(shí)間，另外，可以采用低粘度的溶劑做流動(dòng)相或增加色譜柱的使用溫度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色譜柱的壓力。

　　色譜柱填料方法有下面這些：

　　a、反相（與離子對(duì)）方法

　　C18（十八烷基或ODS）-----------普適性好；保留性強(qiáng)，用途廣

　　C8（辛基）-----------與C18相似，但保留值稍小

　　C3，C4-----------保留值小；大多用于肽類與蛋白質(zhì)

　　C1【三加基硅烷（TMS）】------保留值小；不穩(wěn)定

　　苯基，苯乙基-----------保留值適中；選擇性有所不同

　　CN（氰基）-----------保留值適中；正相和反相均可使用

　　NH2（氨基）-----------保留性弱；用于烴類；欠穩(wěn)定

　　聚苯乙烯基b-----------在1＜PH＜13的流動(dòng)相中穩(wěn)定；對(duì)某些分離峰形好，柱子壽命長(zhǎng)

　　b、正相方法

　　CN（氰基）-----------普適性好；極性適中；用途廣

　　OH（二醇基）-----------極性大于CN

　　NH2（氨基）-----------極性大，欠穩(wěn)定

　　硅膠b------------普適性好；價(jià)廉；操作欠方便；用于制備LC

　　c、空間排阻方法

　　硅膠b-----------普適性很好；作吸附劑用

　　硅烷化硅膠-----------吸附性弱，溶劑兼容性好；適用于有機(jī)溶劑

　　OH（二醇基）------------欠穩(wěn)定；在水SEC中使用（凝膠過濾）

　　聚苯乙烯基b------------廣泛用于有機(jī)SEC（凝膠滲透）；一般與水和極性大的有機(jī)溶劑不相容

　　d、離子交換方法

　　鍵合相------------穩(wěn)定性與重現(xiàn)性均不好

　　聚苯乙烯基b-------------柱效不高；穩(wěn)定；重現(xiàn)性好

　　好了，以上便是關(guān)于色譜柱填料的相關(guān)內(nèi)容介紹了。