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液相色譜作為常用的色譜被廣泛應(yīng)用于生物、化學(xué)、食品分析等領(lǐng)域,hplc的種類有哪些?恒譜生帶你了解!一、液相色譜的種類1、吸附色譜以硅膠或氧化鋁為固定相。分子與硅膠之間的弱相互作用鍵稱為吸附,鍵的溶解解吸。由于洗脫液分子先于樣品分子占據(jù)硅膠的活性位點,因此樣品分子只有在與活性位點的相互作用強于洗脫液分子時才能被吸附。樣品分子通過偶極-偶極相互作用可逆地結(jié)合到固定相。固定相對物質(zhì)的保留時間取決于與固定相表面相互作用的程度不同。這是分離樣品成分的機制。2、親和層析使用物質(zhì)相互反應(yīng)...
將C18固定相稱為用的最多的化學(xué)物質(zhì)之一可能更合適。在色譜柱供應(yīng)商中,這一階段的不斷增長的品種肯定不少。然而,在我們深入研究手頭的主題之前,這里簡要回顧一下C18固定相是如何產(chǎn)生的。一、反相色譜隨著更多科學(xué)家參與反相色譜該領(lǐng)域,色譜中引入了額外的分離模式,以分離和純化許多不同基質(zhì)中的多種化合物。在色譜中,首先從色譜柱中洗脫的是離子型和強極性分析物,疏水性更強的分析物其次。與Tsvet的實驗相比,這些化合物以相反的順序洗脫。因此,該系統(tǒng)被稱為“反相”色譜。RP技術(shù)的最終目標(biāo)是分...
高效液相色譜(HPLC)是一種流行且用途廣泛的技術(shù),可為復(fù)雜有機樣品的成分的分離、鑒定和定量提供經(jīng)濟實惠的解決方案。了解各個組成部分以及每個組成部分如何有助于分析的整體可靠性非常重要。一、高效液相色譜及其部件介紹系統(tǒng)主要組成部分為:泵、探測器;根據(jù)應(yīng)用產(chǎn)生無限數(shù)量的其他配置。比如流動相、色譜柱、管線、保護柱等。二、什么是高效液相色譜?HPLC是一種用于分離、鑒定和量化混合物中成分的技術(shù)。特別適用于不易揮發(fā)、熱不穩(wěn)定和高分子量的化合物。1、流動相液相以恒定速率泵送到裝有固定相的...
柱層析被描述為一種色譜常用的技術(shù),其中待分離的物質(zhì)被置于裝有吸附劑(固定相)的柱子的最高點上,以不同的速率通過柱子,這取決于每種物質(zhì)對吸附劑的親和力。吸附劑和溶劑或溶劑混合物,并且通常在不同時間從柱中通過時聚集在溶液中。兩種最常見的柱色譜固定相是硅膠和氧化鋁,而有機溶劑被認(rèn)為是最常見的流動相。一、柱層析原理柱層析的主要原理是在固定相的幫助下吸附溶液中的溶質(zhì),然后將混合物分離成獨立的成分。當(dāng)流動相與需要分離的混合物一起從色譜柱頂部進(jìn)入時,混合物中的各組分以不同的速率運動。與對固...
使用高效液相色譜(HPLC)分析樣品廣泛應(yīng)用于藥物成分分析、食品添加劑測定和環(huán)境樣品測試是目前普遍的一個方法。由于液相色譜柱在許多實驗室中是核心設(shè)備且價格昂貴,因此保護其免受損壞是延長色譜柱壽命和降低成本的首要考慮因素。維護良好的色譜柱還可產(chǎn)生一致、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù),支持可靠的分析結(jié)果。1.如何提高色譜柱的性能?色譜柱性能取決于許多因素,包括樣品特性、不溶性顆粒的存在以及使用后的清潔和維護。然而,并非所有的實驗條件在使用期間都是理想的。例如,一些樣品具有苛刻但必要的pH條件。因此,...
c18液相色譜柱在使用中常見的問題就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正常現(xiàn)象。但柱壓在使用過程中突然升高,可能的原因有如下幾點:1、液相色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染;2、色譜柱頭的填料被樣品污染;3、色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結(jié)晶析出;4、流動相pH值過大或過小使固定相結(jié)構(gòu)破壞或溶解。液相色譜柱解決辦法如下:1、如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸...