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如何正確選擇分析保護(hù)柱?

更新時(shí)間:2022-03-23      點(diǎn)擊次數(shù):1311
  分析保護(hù)柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護(hù)柱可大大降低分析柱受污染的程度,延長分析柱使用壽命。
  保護(hù)柱位于進(jìn)樣器與分析柱之間,作用主要兩方面:
  1.截留不溶性顆粒
  2.吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)
  以下幾種情況建議使用保護(hù)柱:
  1.中藥、天然產(chǎn)物及合成中間體等基質(zhì)較復(fù)雜的樣品分析——因溶解性差異導(dǎo)致樣品析出而污染分析柱的情況比較嚴(yán)重,梯度洗脫時(shí)影響更大。
  2.生物樣品分析——因樣品的不可逆吸附導(dǎo)致的污染,保護(hù)柱可先于分析柱承受這種污染,從而延長分析柱壽命。
  保護(hù)柱很重要,但選擇合適的保護(hù)柱更重要,選擇或使用不當(dāng)也可能帶來截然相反的效果。
  分析保護(hù)柱分類及選擇:
  從材質(zhì)上分:不銹鋼材質(zhì)和PEEK(聚醚醚酮)材質(zhì)
  PEEK材質(zhì)優(yōu)缺點(diǎn)——樣品對金屬離子比較敏感時(shí),選擇PEEK材質(zhì)比較合適,比如某些蛋白分析會用到PEEK材質(zhì)的分析柱,主要就是考慮到這方面的因素;
  不銹鋼材質(zhì)優(yōu)缺點(diǎn)——大部分小分子化合物的分析,選擇不銹鋼材質(zhì)保護(hù)柱居多,特別是當(dāng)流動相體系使用到四氫呋喃(THF)或DMSO等一些溶解性較強(qiáng)的溶劑時(shí),必須選擇不銹鋼材質(zhì),甚至對于HPLC系統(tǒng)的管路也需要替換成不銹鋼材質(zhì),因THF對于PEEK管路有相當(dāng)強(qiáng)的腐蝕作用。
  從結(jié)構(gòu)上分:卡套式(柱芯+柱套)和直接填裝短柱
  直接填裝短柱優(yōu)缺點(diǎn)——這種結(jié)構(gòu)的保護(hù)柱實(shí)質(zhì)就是短的色譜柱,一般填裝的填料跟分析柱填料*一樣。生物樣品分析中,用這種類型保護(hù)柱居多,除可過濾一些不溶顆粒外,還可除去一些在分析柱上易吸附的雜質(zhì)。缺點(diǎn)是,一次性使用,污染嚴(yán)重時(shí),只能報(bào)廢。
  卡套式保護(hù)柱優(yōu)缺點(diǎn)——卡套式保護(hù)柱的柱套可反復(fù)使用,柱芯污染后可替換,廠家會提供配套的保護(hù)柱芯,但購買時(shí)需要注意,柱芯中有與分析柱匹配的填料,需要確認(rèn)柱芯中的填料類型再購買。同時(shí),柱芯和柱套需是來源于同一廠家的同一規(guī)格,否則,會存在匹配上的差異,導(dǎo)致峰型異?;蛘呗┮?。
  從連接方式上分:獨(dú)立式和直連式
  獨(dú)立式分析保護(hù)柱優(yōu)缺點(diǎn)——保護(hù)柱和分析柱之間用一段管路連接,不用擔(dān)心與分析柱在連接上的匹配問題。但使用管路連接時(shí),連接不當(dāng)容易產(chǎn)生死體積。
  直連式保護(hù)柱優(yōu)缺點(diǎn)——保護(hù)柱接口帶螺紋,可直接與分析柱連接,死體積小,UPLC分析時(shí)建議選擇直連式保護(hù)柱;缺點(diǎn):購買時(shí)需保證接口與分析柱匹配。
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